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辽宁产苍术属植物种质资源及药材质量思考

日期:2022年02月26日 编辑:ad201107111759308692 作者:无忧论文网 点击次数:167
论文价格:150元/篇 论文编号:lw202202201349515189 论文字数:62555 所属栏目:医药学论文
论文地区:中国 论文语种:中文 论文用途:硕士毕业论文 Master Thesis

本文是一篇医药学论文,本研究有以下创新点:(1)首次通过化学成分测定与生物学性状进行相关性分析,探究苍术类药材化学成分与生物学性状的关系。(2)首次利用DNA条形码技术对辽宁省苍术属植物进行鉴定,从分子生物学角度建议将北苍术、茅苍术合并,将北苍术列为茅苍术的亚种,茅苍术作为原亚种。

第一章 苍术的本草考证与资源分布研究

1 苍术本草考证

苍术和白术的区分

术,早在《尔雅》[3]中就有“术,山蓟”的记载但未详述。而汉代《神农本草经》[4]中将“术”列为上品。《伤寒论》[5]和《金匮要略》[6]中所记载方中只应用白术而没有记载苍术的使用。

魏晋时期《吴普本草》[7]中对术的记载与《神农本草经》大体一致。《医心方》[8]为日本现存最早的中医养生疗疾名典,收录为宋代之前的医学著作,其中治眼方中使用白术,《千金方》[9]均使用白术,并未见“苍术”和“术之称”。南北朝梁代陶弘景所编撰的《本草经集注》[10]中才有明确的划分,对二者形态进行了描述:“术乃有两种,白术叶大有毛而作桠,根甜而少膏......赤术叶细无桠,根小苦而多膏”。

唐代时期《新修本草》[11]与《本经》中记载一致。晚唐时期《仙授理伤续断秘方》[12]中苍术和白术的使用较为分明。乳香散、鳖甲散、小红丸等使用苍术入药;排风汤使用白术入药。五代后蜀《日华子本草》[13]谓:“苍者去皮”,“苍者”大概指的就是苍术。

宋代时期,《开宝本草》[14]也只言“术”未做区分,与《新修本草》一致。《图经本草》[15]描述术的形态为“青色无桠”,并论述“凡古方云术者,乃白术也,非谓今之术矣”,说明《图经本草》中描述的术不是白术,而是苍术。表明宋代作为药用的“术”为苍术而不是白术。但是在《太平惠民和剂局方》[16]中苍术和白术又存在于不同的方中,乌犀丸、牛黄清心丸、五痹汤等使用白术,活血应痛丸、秘方换腿丸、林檎散等使用苍术;也有二术同时使用的方,例如:葱白散、渗湿汤等,与这种情况相似的还有《大观本草》[17]。这也说明了当时人们对苍术、白术的认识不够充分,才出现了混用的状况。而《证类本草》[18]中记载“术”与“白术”并未记载“苍术”进一步说明了在宋时二术的使用混乱。平附张存惠将寇宗奭的《本草衍义》[19]中对苍术和白术形态进行了详细的描述:“苍术:长度如“大拇指”,质地肥实,表皮为褐色,气味辛烈。白术:粗促,表皮浅褐色,气味微辛,苦而不烈。……人多贵白者。……惟用白者,将苍术置而不用”。通过对苍术和白术形态,性味的描述,阐明其二者的区别,也解释了“重白轻苍”的原因。也举例说明了苍术的价值并非一文不值,只源于古人认为白术更加珍贵。为以后苍术和白术的“区别对待”打下基础,指导了临床的使用。

2 中药苍术资源及其分布

苍术Atractylodes Lancea 首载于《本草经集注》中并作为药用,被称为“赤术”。《中国药典》 收载菊科植物茅苍术Atractylodes lancea(Thunb.)DC.或北苍术Atractylodeschinensis(DC.)Koidz.的干燥根茎为苍术正品基源。性温,味辛、苦;归脾、胃、肝经。功能燥湿徤脾,祛风散寒,明目;主治用于湿阻中焦,脘腹胀满,泄泻,水肿,脚气痿蹵,风湿痹痛,风寒感冒,夜盲,眼目昏涩[1]。

菊科Compositae苍术属Atractylodes DC.约有7种,分布于亚洲东部,有5种在我国分布。主要分布于东北,华北、江浙等地[79]。其中药用5种包括:(1)朝鲜苍术 Atractylodescoreana (Nakai) Kitam. 药用部位:根状茎。(2)苍术 Atractylodes Lancea (Thunb.) DC. 药用部位:根状茎:中药名“苍术”(3)白术Atractylodes macrocephala Koidz. 药用部位:根状茎;中药名“白术”(4)关苍术 Atractylodes japonica Koidz.ex Kitam. 药用部位:根状茎;中国东北地区作“朝白术”使用,朝鲜、日本作白术使用。(5)鄂西苍术Atractylodescarlinoides (Hand. -Mazz.) Kitam. 药用部位:根状茎。

第二章 辽宁产苍术属植物挥发性成分含量比较

材料与方法

1 实验材料与仪器

1.1仪器 Aglient 6890N(FID)气相色谱仪;HP-5(0.32 mm×30 m)石英弹性毛细管柱;FA1 104型电子分析天平(上海方瑞电子有限公司);CP225D型电子天平(德国Sartorius公司);KQ5200DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);FW100型高速万能粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公司);DHG-9145A型鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司);WKY II2型微量移液器(上海佳安分析仪器厂)。1.2 试药 纯净水(杭州娃哈哈集团有限公司);正己烷(分析纯,天津科密欧试剂有限公司);苍术素(纯度≥98%)、β-桉叶醇(纯度≥98%)、苍术酮(纯度≥85%)、正十六醇(纯度≥99%)以上对照品均购于上海源叶生物科技有限公司。苍术样品分别收集于辽宁省大连、鞍山、抚顺、本溪等市及所属县区,经辽宁中医药大学尹海波教授为茅苍术Atractylodeslancea (Thunb.)DC.、北苍术 Atractylodes chinensis (DC. ) K oidz、关苍术Atractylodes japonicaKoidz. ex Kitam、朝鲜苍术Atractylodes coreana (Nakai) Kitam。样品信息见表2-1。

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实验结果

1.聚类分析

通过对18批苍术属植物的3种挥发性成分β-桉叶醇、苍术酮、苍术素的含量进行聚类分析,将3种成分数据标准化处理后,运用SPSS 24.0统计软件系统聚类,除8号与12号样品外,4种苍术属植物各个种之间聚类结果良好。见图2-3。

2.苍术属植物化学成分含量比较

2.1不同种类苍术属植物野生品含量比较

使用SPSS 24.0统计软件,利用方差分析的统计方法,对野生朝鲜苍术、北苍术、关苍术进行两两比较。以LSD法对三种苍术的苍术酮、苍术素两种成分含量进行了差异性分析。结果显示p=0.174>0.05北苍术与朝鲜苍术在苍术酮含量上没有显著性差异;p=0.009<0.05北苍术与关苍术在苍术酮含量上有显著性差异;p=0.002<0.05朝鲜苍术与关苍术在苍术酮含量上有显著性差异。S-N-K法结果显示将三种苍术分成两个子集:朝鲜苍术0.267833、北苍术4.663733为一个子集,关苍术15.396867为一个子集,关苍术在苍术酮水平上远远高于其他两种苍术。

三者苍术素分析结果显示p=0.000<0.05北苍术与朝鲜苍术在苍术素含量上有显著性差异;p=0.001<0.05北苍术与关苍术在苍术素含量上有显著性差异;p=0.00<0.05朝鲜苍术与关苍术在苍术素含量上有显著性差异。S-N-K法结果显示将三种苍术分为三个子集关苍术0.00000、北苍术1.329733、朝鲜苍术2.769100。在苍术素水平上朝鲜苍术最高。

第三章 辽宁产苍术属植物水溶性成分含量比较........................ 40

材料与方法............................40

实验结果...............................45

第四章 辽宁产苍术属植物DNA条形码鉴定研究............................. 46

第一节 基于ITS2序列苍术属植物DNA条形码鉴定研究..................................46

第二节 基于psbA-trnH序列苍术属植物DNA条形码鉴定研究.........................53

第五章 辽宁产苍术属植物化学成分与生物学性状相关性分析........................... 88

第五章 辽宁产苍术属植物化学成分与药材性状相关性分析

1 实验材料与仪器

1.1 仪器数显卡尺(上海九量五金工具有限公司)

1.2 样品:同“第二章1.3”

2 实验方法

应用数显卡尺测量苍术根茎长度、根茎粗细,通过人工计数的方式计算朱砂点数量,根据测得的根茎粗细计算横切面面积,计算得到单位面积朱砂点数量。数据见表5-1。

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结论

1 通过对苍术的本草考证发现苍术与白术在历史上混用过一段时期,唐朝才从形态、功效等方面才区分。苍术首次记载为陕西地区,之后遍布东北、华北等地。主要功效沿用至今,炮制方法由历史主流方法“米泔水制”发展成“炒制”“生用”,可能是由于米泔水制工艺复杂,米泔水不易得,现在苍术药材需求量较大,这种方法会产生供不应求的现象,因此不再使用。古方应用方面苍术配伍其他中药用于治疗腰酸背痛、呕吐等症与现代苍术的使用相似。对苍术本草考证明确苍术历史,对苍术现代应用具有潜在价值。

2 药材化学成分的含量影响着药材的质量,通过测定中药及其近缘种的化学成分含量通过分类的方法可以将同属不同种的药材分开。本实验通过系统聚类的方法理清了辽宁省四种苍术属植物。通过含量测定发现辽宁省关苍术不含苍术素,部分苍术不含或少含β-桉叶醇,通过方差分析指标性成分苍术素野生品含量:朝鲜苍术>北苍术>关苍术;栽培品:北苍术>茅苍术>关苍术。同时发现苍术素与苍术酮呈负相关关系,在栽培种植方便可以通过干预苍术酮的含量,提高苍术素含量。水溶性成分测定苍术苷A含量分析得到野生北苍术>栽培北苍术。通过统计分析发现可以观察外观性状根茎长度和朱砂点数量判断指标性成分含量,根茎长